在做慢病毒包裝實驗中，有科研小伙伴常遇到：用同樣的病毒載體系統(tǒng)進行病毒包裝實驗，為什么有人做的很好，次次成功，有人卻是時常做不出來，穩(wěn)定性很差，不是滴度低就是沒有轉進去?花費了大量的時間和精力去找原因，實在是很心酸呢！

慢病毒包裝有幾個關鍵因素：細胞因素、載體系統(tǒng)、質粒抽提純化情況

• 細胞因素

用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要！！當然也要保證細胞狀態(tài)特別好，沒有細微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的病毒哦！

• 載體系統(tǒng)

在實驗中最常見的慢病毒載體系統(tǒng)有三質粒系統(tǒng)、四質粒系統(tǒng)，當然使用三質粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！

• 載體構建和質粒抽提純化

我們要注意是否構建時導致質粒載體重組或某個部件缺失，或污染別的質粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達載體構建純化良好，質粒間比例得當，并且對質粒進行酶切驗證。

• 細胞轉染

如果以上都沒有問題，那么最最最重要的環(huán)節(jié)就是慢病毒質粒轉染293T細胞了，轉染效果直接影響著出毒效率，那么一款好的轉染試劑在此時就是至關重要了！在這里給大家推薦一款性價比超高的轉染試劑，美國Polysciences家的PEI MAX 40K！

PEI MAX 40K（也稱為游離堿PEI 22K）是一種功能強大，值得信賴且經(jīng)濟高效的瞬時轉染試劑。在HEK293和CHO表達系統(tǒng)中，能在96孔板至100L生物反應器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉染試劑，以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉染試劑，使用自行制備的PEI轉染試劑可以使總轉染成本降低高達40％左右。

Thomas M，et al（2005）研究數(shù)據(jù)表明，去乙酰化的PEI40000（Polyethylenimine MAX40000）體外質粒DNA轉染效率提高21倍，小鼠體內(nèi)靶向效率達到10000倍，隨之肺部特異療效顯示增強1500倍。

這么好的效果，你一定知道美國Polysciences公司！

美國Polysciences公司是一家成立于1961年，致力于特殊技精細化學試劑、實驗室產(chǎn)品，單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應，所提供的產(chǎn)品服務于組織學（顯微技術）、生物技術、電子技術、護理及制藥工程等多個領域。起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案，幫助科學家揭示未知領域。隨后，開拓了在病理（組織研究）應用產(chǎn)品，使組織除了石蠟包埋外，還能夠包埋在塑料塊中；開發(fā)染料和染色劑，以實現(xiàn)更好的樣品觀測方式。與政府機構合作，開發(fā)了用于診斷試劑盒應的聚合物微球。與美國國家癌癥中心合作，開發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品，并用于紫杉醇的初步臨床試驗。繼而開發(fā)出超順磁珠，用于DNA、蛋白質和肽的研究。Polysciences的高純度單體和聚合物產(chǎn)品在醫(yī)療器械中有許多應用，并不斷開發(fā)和增強其性能。公司秉承為應用而研發(fā)，目前已擁有超過3000種產(chǎn)品。

質量保證

• 遵循ISO 13485質量管理認證
• 獲得美國FDA有效注冊
• 遵守良好生產(chǎn)規(guī)范（cGMP）
• 獲得管理系統(tǒng)CSMS認證
• 特種化學行業(yè)公認的代言人

功能強大、經(jīng)濟實惠、安全可靠

這么好的轉染試劑，難道你不心動嗎？

華雅思創(chuàng)生物經(jīng)營品牌

經(jīng)過幾年的不懈努力，華雅思創(chuàng)生物提供的產(chǎn)品覆蓋免疫細胞治療、干細胞治療、干細胞基礎研究、動物模型疾病研究、基因檢測（NGS）、試管嬰兒、產(chǎn)品質控等諸多熱點科學研究領域。如今，華雅思創(chuàng)已經(jīng)成為Lifeline、Takara、Origen、Corning、BD、Peprotech、illumina、BECKMAN、LONZA、CellGenix、Stemcell、Labobanker2、Gibco、StemRD、PreAnalytiX、Irvine Scientific、eBioscience、CSTI等五十余家國際知名企業(yè)代理商，為中國廣大科研伙伴提供全面解決方案！

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