產(chǎn)品英文名稱：Calcein-AM
產(chǎn)品中文名稱：Calcein-AM 細(xì)胞染色劑

Calcein-AM 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
分 子 式: C46H46N2O23
分 子 量: 994.86
外      觀: 白色或淺黃色晶體
別      名: 鈣黃綠素
純      度: 90%以上（HPLC）
儲(chǔ)存條件: -20℃
運(yùn)輸條件: 室溫

Calcein-AM 產(chǎn)品描述
Calcein-AM是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑，由于它在Calcein的基礎(chǔ)上加強(qiáng)了疏水性，因此能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。當(dāng)其進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)后，酯酶會(huì)將其水解為Calcein留在細(xì)胞內(nèi)，發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate) 相比，Calcein-AM是最適合作為熒光探針去染活細(xì)胞的，因?yàn)樗募?xì)胞毒性很低。Calcein不會(huì)抑制任何的細(xì)胞功能如增殖或淋巴球的趨化性。使用了Calcein的活性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是十分可信并且與標(biāo)準(zhǔn)的51Cr-釋放法所得結(jié)果相一致的。Calcein的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為490 nm和515 nm。
Calcein-AM可與PI結(jié)合使用，分別對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞染色，可用于同時(shí)對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞進(jìn)行熒光染色。

Calcein-AM 產(chǎn)品特性
Calcein-AM是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑，Calcein-AM由于在Calcein(鈣黃綠素)的基礎(chǔ)上加強(qiáng)了疏水性，因此能夠輕易穿透活細(xì)胞膜。當(dāng)其進(jìn)入到細(xì)胞質(zhì)后，酯酶會(huì)將其水解為Calcein(鈣黃綠素)留在細(xì)胞內(nèi),發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑（如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate）相比，Calcein-AM是最適合作為熒光探針去染活細(xì)胞的，因?yàn)樗募?xì)胞毒性很低。Calcein(鈣黃綠素)不會(huì)抑制任何的細(xì)胞功能如增殖或淋巴球的趨化性。另外，使用了Calcein(鈣黃綠素)的活性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是十分可信并且與標(biāo)準(zhǔn)的51Cr-釋放法所得結(jié)果相一致的。Calcein(鈣黃綠素)的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為490 nm和515 nm。
Calcein-AM和碘化丙啶（PI）溶液，它們分別可對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞染色。Calcein-AM的乙酸甲基酯親脂性很高，使其可透過(guò)細(xì)胞膜，通過(guò)活細(xì)胞內(nèi)的酯酶作用，Calcein-AM能脫去AM基，產(chǎn)生的Calcein(鈣黃綠素)能發(fā)出強(qiáng)綠色熒光，因此Calcein-AM僅對(duì)活細(xì)胞染色。另一方面，作為核染色染料的PI不能穿過(guò)活細(xì)胞的細(xì)胞膜。它穿過(guò)死細(xì)胞膜的無(wú)序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核，并嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光（激發(fā)：535 nm，發(fā)射：617 nm），因此PI僅對(duì)死細(xì)胞染色。由于Calcein(鈣黃綠素)和PI-DNA都可被490 nm激發(fā)，因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。用545 nm激發(fā)，僅可觀察到死細(xì)胞。根據(jù)以上特點(diǎn)，Calcein-AM和碘化丙啶（PI）經(jīng)常被結(jié)合用來(lái)作為活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色。
由于不同細(xì)胞系的最佳染色條件不同，我們建議個(gè)別確定Calcein-AM和PI的合適濃度。

Calcein-AM 使用注意事項(xiàng)
1、試劑容易吸潮，從冰箱取出后，請(qǐng)確認(rèn)在干燥的環(huán)境放至室溫后再開(kāi)封。由于試劑極其微量，開(kāi)封前，請(qǐng)輕彈管壁幾次，以保證粉末落入管底。
2、第一次使用時(shí), 建議母液即配即用。試劑溶解后盡可能在短時(shí)間內(nèi)使用，以保證實(shí)驗(yàn)效果。
3、溶解液DMSO需要保證新鮮無(wú)水，否則將會(huì)導(dǎo)致AM體水解，使熒光染料無(wú)法進(jìn)入細(xì)胞，影響實(shí)驗(yàn)效果。
4、母液遇水極易分解，如果不能一次用完，建議分裝保存，例如分裝成5 μl/管，用封口膜封口，并用鋁箔紙包裹，放在一個(gè)密閉性能好的塑料袋中，并放入一包干燥劑，在≤-20℃密封避光保存。
5、建議您在正式實(shí)驗(yàn)前先摸索一下細(xì)胞量、染色試劑的終濃度、培養(yǎng)時(shí)間等，找到最佳實(shí)驗(yàn)條件。