產(chǎn)品編號：HY-15167

Takara 635748 Capturem? Extracellular Vesicle Isolation Kit (Maxi) 細(xì)胞外囊泡分離試劑盒 8 Maxipreps

Capturem? Extracellular Vesicle Isolation Kit (Maxi)

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8 Maxipreps

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注冊品牌： Takara
生產(chǎn)廠家： Takara
訂購貨號： 635748
規(guī)格型號： 8 Maxipreps
產(chǎn)品編號： HY-15167
產(chǎn)品種類： MSC間充質(zhì)干細(xì)胞產(chǎn)品

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■ 產(chǎn)品概述

本制品是基于Capturem新型膜技術(shù)的一次性使用離心柱，可在30 min內(nèi)實現(xiàn)血漿等多種生物體液樣品中細(xì)胞外囊泡（EVs）的簡單快速提取。其基本原理是根據(jù)EVs的生化性質(zhì)，選擇與其特異性結(jié)合的凝集素（非抗體）固定于Capturem?膜上，進而對EVs進行提取，產(chǎn)物純度高、污染少。

■ 產(chǎn)品特點

·?適用范圍廣— 可應(yīng)用于全血、血漿、血清、唾液、尿液、腦脊液、母乳、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等多種生物體液樣品中的EVs提取
·?快速、重復(fù)性好– 30 min內(nèi)即可從最高850 μl（Mini）或24 ml（Maxi）生物體液樣品中快速提取EVs，不同操作者也可獲得具有重復(fù)性的EVs收量
·?收量高— EVs最高收量可達10¹⁰（Mini）或10¹¹（Maxi），可獲得足夠的exosomal RNA應(yīng)用于下游的RT-qPCR、 NGS等研究
·?純度高— 提取的EVs經(jīng)Western Blot檢測表達exosome蛋白質(zhì)，而不表達nonexosomal污染蛋白質(zhì)，如calnexin和 albumin
·?完整性好– 基于凝集素的提取原理，EVs不易被破壞，TEM下觀察呈經(jīng)典形態(tài)
·?簡單易用— 試劑盒組分配備齊全，包含一次性的預(yù)清潔柱，一次性的離心柱，以及平衡、洗滌和洗脫緩沖液，且經(jīng)過優(yōu)化，操作簡便

■ 操作流程

注：1. *過濾步驟使用100-kDa MWCO的過濾裝置，過濾時間取決于樣品的類型和體積。
2. 本制品最大載樣量約為10¹⁰?EVs/column（Mini）或10¹¹?EVs/column（Maxi），多次上樣收量也不會超過最大值。

■ 實驗例

實驗例 1

與超速離心法相比，本制品分離得到的EVs濃度和純度更高。分別使用本制品和超速離心法從500 μl血漿樣品中分離EVs，進行三次重復(fù)性實驗，使用Nanoparticle tracking analysis (NTA) 檢測。每種方法的粒徑分布計算以平均值（黑線）和標(biāo)準(zhǔn)誤差（紅線）顯示。結(jié)果顯示，本制品提取的EVs平均粒徑大小為81 nm（D90=110 nm），超速離心法提取的EVs平均粒徑大小為135 nm（D90=203 nm）。上圖可見，使用本制品提取的EVs具有更窄的粒徑分布范圍，且穩(wěn)定性更好。

實驗例 2

使用本制品成功地從不同生物體液樣品中提取EVs。上圖NTA結(jié)果顯示，本制品可以應(yīng)用于多種生物體液樣品的EVs提取，如母乳、唾液、腦脊液、血清、尿液、條件培養(yǎng)基。每種方法的粒徑分布計算以平均值（黑線）和標(biāo)準(zhǔn)誤差（紅線）顯示。

實驗例 3

對使用本制品與超速離心法提取的EVs中的目的蛋白質(zhì)進行Western blot分析。結(jié)果顯示，與超速離心法相比，本制品提取的EVs包含更多的exosome特異性標(biāo)記物CD63、CD9和Alix，而non-exosome蛋白質(zhì)（calnexin和albumin）含量較少。因此，本制品提取的EVs純度更高、污染蛋白質(zhì)更少。

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