產品名稱：BD stain buffer染色緩沖液 500mL裝

產品貨號:? 554656

英文名稱：Stain Buffer (FBS)

產品規(guī)格：500 mL

產品品牌：BD

產品簡介：

BD Pharmingen stain buffer染色緩沖液(FBS)可用于淋巴組織、骨髓、外周血或培養(yǎng)細胞制備的單細胞懸液的免疫熒光染色。染色緩沖液(FBS)對熒光試劑的稀釋和應用以及用于流式細胞儀分析的細胞的懸浮液、洗滌和存儲都是有用的。基于之前對染色培養(yǎng)基的報道，染色緩沖液(FBS)被配制成中性pH (pH 7.4)緩沖鹽溶液(即DPBS)，其中添加了熱滅活(56°C, 30分鐘)胎牛血清(FBS)蛋白。因此，染色緩沖液(FBS)旨在維持細胞活力，并最大限度地提高ph敏感熒光色素(如異硫氰酸熒光素(FITC))產生的熒光信號強度。此外，染色緩沖液(FBS)含有代謝抑制劑。NaN3抑制抗體交聯引起的細胞表面抗原的潛在再分配(例如，由于脫落或內化)。因此，在后續(xù)的流式細胞術分析中，NaN3(與維持低溫環(huán)境溫度相結合)可以防止免疫熒光染色細胞產生的熒光信號強度的潛在損失。

產品應用:

流式細胞術(常規(guī)檢測)

運輸與儲存：

保存在4°C未稀釋。

推薦的實驗流程：

1. 使用標準方案從淋巴組織、骨髓、外周血或細胞培養(yǎng)中制備單細胞懸液。

2. 在冷染色緩沖液(FBS)中洗滌細胞兩次，并通過離心將細胞制成顆粒(例如，在4°C下300 x g)。用冷染色緩沖液(FBS)重懸細胞顆粒至最終濃度為2 × 10e7 cells/ml。

3.將50μl等量的細胞懸液(10e6細胞)分配到試管或微孔板的圓底孔中。

4. 在染色緩沖液(FBS)中稀釋熒光抗體至預定的最佳濃度，并將少量稀釋抗體(如10μl)加入含有目標細胞懸液的試管或微孔中。在避光冰上孵育20分鐘。染色時間可能增加(≥45分鐘)取決于熒光抗體的熱情。

5. 用200μl(微孔板)或1ml(試管)染色緩沖液(FBS)洗滌細胞兩次，以去除未結合的抗體。細胞以300 x g離心5分鐘。每次離心后，小心地抽吸(用于微孔板或試管)或倒置并吸走(用于試管)細胞顆粒上清。

6. 將細胞顆粒重懸在200μl(用于微孔板)或0.5 ml(用于試管)的染色緩沖液(FBS)中。將染色細胞從微孔板轉移到適當的試管中進行流式細胞分析(將最終體積調整到~0.5 ml)。

7. 染色后盡快(如≤4小時)用流式細胞儀分析染色后的細胞樣本。如果必須延遲分析，那么染色細胞可以用緩沖多聚甲醛固定(例如，BD Cytofix?固定緩沖液;貓。編號554655)，4°C保存(避光)。應盡快對固定的細胞進行分析(如染色和固定后一周)

注1:染色緩沖液(FBS)同樣可以用于細胞的間接免疫熒光染色。在這種情況下，當使用未標記或生物素化一抗時，重復步驟4和步驟5。當使用生物素化抗體和熒光偶聯親和素對細胞進行染色時，最好使用不含生物素的染色介質，如染色緩沖液(BSA) (Cat。554657號)

注2:染色緩沖液(FBS)也可用于固定細胞表達的表面抗原的免疫熒光染色和細胞內抗原(如細胞因子)的免疫熒光染色。細胞內細胞因子染色的細胞可以在流式細胞儀分析之前，在染色緩沖液(FBS)中重懸和維持(例如，在4°C，避光)。

產品訂購信息：

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關于公司：

BD 多色流式細胞術提供了各種目標細胞亞群的快速、多參數分析。其應用包括免疫學、免疫腫瘤學、病毒學、免疫監(jiān)測等。

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