產(chǎn)品英文名稱(chēng)：Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit
產(chǎn)品中文名稱(chēng)：Cygnus F410 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測(cè)試劑盒

Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品介紹：
Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測(cè)試劑盒主要設(shè)計(jì)用于檢測(cè)產(chǎn)物重組表達(dá)過(guò)程中大腸桿菌宿主細(xì)胞污染，試劑盒使用的多克隆抗體對(duì)數(shù)百種HCPs具有反應(yīng)性。Cygnus F410 E.coli HCP 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)最低濃度可達(dá)到 0.2ng/mL。
ELISA檢測(cè)相比Western Blot：Western Blots檢測(cè)過(guò)程復(fù)雜并需借助程序分析結(jié)果。而且，Western Blot本質(zhì)上是定性分析，不能得到定量結(jié)果，檢測(cè)靈敏性也受到樣本體積的限制。Western Blot在下游純化過(guò)程中檢測(cè)產(chǎn)物HCPs缺乏靈敏度和特異性。而微量滴定板ELISA檢測(cè)可以克服上述限制。ELISA具備高度靈敏性，可獲得半定量結(jié)果，是純化工藝，過(guò)程控制，常規(guī)質(zhì)量檢測(cè)的最佳選擇。

產(chǎn)品使用時(shí)一定要做好保護(hù)措施：0.5M硫磺酸有強(qiáng)腐蝕性，要避免接觸眼睛、皮膚和衣物。檢測(cè)前所有試劑都要平衡到室溫。

§Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 檢測(cè)原理：大腸桿菌E. coli檢測(cè)是一個(gè)雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫檢測(cè)。樣本中包含的E. coli HCPs蛋白與標(biāo)記有抗-E. coli 抗體的辣根過(guò)氧化物酶同時(shí)反應(yīng)，反應(yīng)發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗-E. coli 蛋白抗體的微量滴定板中進(jìn)行。免疫反應(yīng)構(gòu)成為夾層式結(jié)構(gòu)：固相抗休-HCP-酶標(biāo)記抗體。反應(yīng)結(jié)束后清洗微量滴定板去除未結(jié)合反應(yīng)物。添加TMB作用底物反應(yīng)。微量滴定板讀數(shù)器上測(cè)定水解物濃度，水解物濃度與E. coli? HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標(biāo)準(zhǔn)液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，根據(jù)讀數(shù)可以計(jì)算出E. coli HCPs蛋白含量。

§Cygnus F410 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)過(guò)程：取出所有試劑平衡到室溫→分別移取25μl Cygnus F410 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)液，對(duì)照物和樣品至待測(cè)孔→移取100μl anti-E. coli:HRP(#F411)至每孔→密封滴定板，搖床室溫溫育90分鐘，180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350μl清洗緩沖液清洗4次→加100μl TMB 作用物(#F005)→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100μl反應(yīng)終止液(#F006)→分光光度計(jì)450/650nm讀數(shù)

§Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 檢測(cè)結(jié)果分析：Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)可用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，標(biāo)準(zhǔn)液濃度相當(dāng)于免疫反應(yīng)HCP總濃度。根據(jù)測(cè)定的小孔中標(biāo)準(zhǔn)液吸光值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 檢測(cè)結(jié)果數(shù)據(jù)分析可以使用計(jì)算機(jī)選配曲線(xiàn)，例如點(diǎn)到點(diǎn)，三次樣本函數(shù)，或四參數(shù)邏輯曲線(xiàn)。不要使用線(xiàn)性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會(huì)出現(xiàn)顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標(biāo)注吸光值，X軸標(biāo)注濃度。然后根據(jù)樣品吸光值計(jì)算出樣品中HCP濃度。（操作時(shí)每一濃度標(biāo)準(zhǔn)液都要滴定到兩個(gè)小孔中，以便計(jì)算平均分光光度值，樣品也需計(jì)算平均吸光值）。
Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit 組成成份：
● Anti- E. coli:HRP(辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記)　??????????? 1x12mL??? F411(Product#)
● Anti- E. coli coated微量滴定板　??????????????????????? 12×8孔　?? F412
● E. coli HCP標(biāo)準(zhǔn)液(0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL)???? 1mL/瓶　? F413
● Stop Solution終止液(0.5M硫磺酸)? 　　　?????????? 1x12mL　F006
● TMB (3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯氨)　????????????????????????? 1x12mL　 ?F005
● Wash Concentrate清洗物(20倍濃縮)　??????????????? 1x50mL??? F004

Cygnus F410 大腸桿菌宿主細(xì)胞ELISA檢測(cè)試劑盒 英文簡(jiǎn)述：
Cygnus F410 E.coli HCP ELISA Kit was developed using broadly reactive polyclonal antibodies to the hundreds of different HCPs and is intended for use in determining the presence of E.coli host cell protein contamination in products manufactured by recombinant expression. Our assay validation has determined that the LOD for this kit is ~0.2ng/mL.