In Situ Cell Death Detection Kit, AP
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英文名稱:In Situ Cell Death Detection Kit, AP
中文名稱:原位細胞凋亡檢測試劑盒, AP
原位細胞凋亡檢測試劑盒, AP 產(chǎn)品介紹:
原位細胞凋亡檢測試劑盒廣泛應用于檢測細胞凋亡,包括利用瓊脂糖凝膠電泳的基因組DNA分析和基于3H-胸腺嘧啶或5-溴-2’-脫氧尿嘧啶的DNA斷裂分析。細胞凋亡早期標志是核DNA連接區(qū)域的選擇性降解。DNA裂解將促使雙鏈或單鏈DNA斷裂。兩種類型斷裂都可用游離3’-OH末端標記的修飾核苷酸(比如,生物素-dUTP, 地高辛-dUTP, 熒光素-dUTP)在酶促反應中檢測到。末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)催化脫氧核糖核苷酸獨立聚合為以3’-端結尾的單鏈和雙鏈DNA。這種方法被稱為TUNEL (TdT介導的dUTP-X 缺口末端標記)。游離3’-OH也可利用DNA聚合酶標記(模板依賴型的缺口平移)。但是,TUNEL方法更靈敏快速。
檢測原理:原位細胞凋亡檢測試劑盒基于對細胞凋亡早期發(fā)生的單鏈和雙鏈DNA斷裂的檢測。凋亡細胞被固定和滲透。隨后,這些細胞和TUNEL反應混合物(包含TdT和熒光素-dUTP)一起孵育。孵育期間,TdT催化熒光素-dUTP標記的游離3’-OH添加到單鏈和雙鏈DNA中。清洗后,標記物包含在DNA斷裂位點處,并被抗熒光素抗體結合物識別標記(報告酶堿性磷酸酶)。清洗去除未結合的酶配體,AP保留在免疫復合物中,可通過底物反應觀察到。
樣本材料:細胞離心涂片器和細胞涂片制備,載玻片上生長的貼壁細胞,冷凍和蠟包被的組織切片
產(chǎn)品特點:
靈敏:最大凋亡細胞標記強度(細胞染色),比缺口平移要高
快速:熒光素-dUTP標記使其在TUNEL反應結束后直接可進行樣本分析(2-3 h)
方便:使用熒光素d-UTP直接標記法可在檢測時確認TUNEL反應效率
準確:可在分子水平(DNA鏈斷裂)鑒定極早期凋亡細胞
靈活:不包含底物;可選擇不同染色方法
產(chǎn)品成份:
• 酶溶液(TdT)
• 標記溶液(熒光素-dUTP)
• 媒介物AP(抗-熒光素抗體-AP),即開可用
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