產(chǎn)品英文名稱：IgG Purification Kit-A
產(chǎn)品中文名稱：IgG純化試劑盒-A

IgG Purification Kit-A 產(chǎn)品特性
整個(gè)過(guò)程在1支過(guò)濾管中進(jìn)行                            
抗體回收率在70%-90%                   
血清中的IgG純度超過(guò)80%                               
30分鐘內(nèi)即可獲得純化后的IgG        
重現(xiàn)性高且沒(méi)有親和損失

IgG Purification Kit-A 產(chǎn)品描述
IgG純化試劑盒用于分離和純化山羊、小鼠、兔及其他動(dòng)物的免疫球蛋白G。該試劑盒包含固定的蛋白質(zhì)A或G以及用于回收IgG的緩沖液。從血清或其他含有IgG的溶液中分離和純化IgG的總時(shí)間約為30分鐘。由于蛋白質(zhì)A或G的支持物為硅膠，離心后凝膠上的殘留溶液的體積非常小。因此，可用兩次洗滌去除所有不與蛋白質(zhì)A結(jié)合的蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)。此外，洗脫過(guò)程中IgG的變性是最少的，因?yàn)榻Y(jié)合到凝膠上的IgG的釋放過(guò)程是非常快速的。此試劑盒中的凝膠可重復(fù)利用10次或更多次而效能不變。用過(guò)的凝膠在0-5℃的洗滌緩沖液中仍可穩(wěn)定存放一年。

IgG Purification Kit-A 試劑盒內(nèi)容
Protein A Cartridge tube………1 管                
Elution buffer………1.8 ml × 1瓶                  
1.5 ml Microtube………5 管 × 2
 Washing buffer………13 ml × 1瓶
 Catching buffer………1 ml × 1瓶

IgG Purification Kit-A所需設(shè)備及材料
離心機(jī)，100-200 μl移液器，voltex混合器，0.5 ml微試管

IgG分離的一般操作方案
1. 將IgG和50 μl Washing buffer混合，制成50 μl樣品溶液。
2. 將步驟1所制得的混合溶液加入到Protein A Pack所包含的筒式試管的小杯中，不要關(guān)閉管蓋。
3. 用手指將杯旋轉(zhuǎn)幾次，以混合凝膠a)。把管放在室溫下靜置2分鐘。
4. 蓋上杯蓋，以最大速度離心30秒。
5. 將濾出液再加入杯中，并重復(fù)步驟3和4 b)。將濾出液轉(zhuǎn)移到0.5 ml管中，并在0-5℃存放c)。
6. 向杯中加入200 μl Washing buffer。不要關(guān)閉管蓋。用手指將杯旋轉(zhuǎn)幾次，以混合凝膠a)。
7. 蓋上杯蓋，以最大速度離心30秒。丟棄儲(chǔ)蓄池的濾出液。
8. 重復(fù)步驟6和7。
9. 向Protein A Pack中的1.5 ml管中加入60 μl Catching buffer。將杯轉(zhuǎn)移到此管中d)。
10. 向杯中加入70 μl Elution buffer。不要關(guān)閉管蓋。用手指將杯旋轉(zhuǎn)幾次，以混合凝膠a)。
11. 蓋上杯蓋并以最大速度離心30秒。
12. 重復(fù)步驟10和11。
13. 取出杯e)。蓋上杯蓋并用voltex混合。將溶液儲(chǔ)存在0-5℃下f)。
a) 傾斜筒式試管并用手指使杯旋轉(zhuǎn)10-20次。
b) 通過(guò)此步驟，IgG的回收率可以提高25-30%以上。可重復(fù)此步驟以得到最大的IgG回收率。
c) 如果IgG的回收率低，則使用此濾出液再次回收IgG。從步驟2開(kāi)始按照操作說(shuō)明進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
d) 不要丟棄儲(chǔ)蓄池。在步驟13中將用到它。
e) 將該杯放回步驟9中保留的儲(chǔ)蓄池中。按照步驟6和7用洗滌緩沖液洗滌凝膠。加入200 μl洗滌緩沖液并使蛋白質(zhì)A凝膠筒式試管保持在0-5℃中。離心該試管并在使用前去除洗滌緩沖液。
f) 可加入等量丙三醇，并儲(chǔ)存于-20℃中。

IgG Purification Kit-A 注意事項(xiàng)
若IgG溶液含有明膠，在使用試劑盒之前可能需要先用酶消化